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Poco antes de morirse, en el año 1530, testó sus derechos a la corona de Castilla a favor del rey JUAN III de Portugal. Sus restos mortales se hallan actualmente desaparecidos, (como consecuencia del terremoto de Lisboa) por lo que resulta imposible la realización de una muestra de su ADN para demostrar su ascendencia.
Juan III de Portugal nació en Lisboa. Juan III de Avis, apodado «el Piadoso» ( Lisboa, 6 de junio de 1502 - ib., 11 de junio de 1557 ), fue rey de Portugal. Sucedió en el trono a su padre, Manuel I el Afortunado . Era hijo del rey Manuel I y de la reina María de Aragón, cuarta hija de los Reyes Católicos.
Juan III, Rey de Portugal (1502-1557). Rey de Portugal, hijo de Manuel. Nació en 1502 y murió en 1557. Sucedió a su padre en 1521; nombró a Vasco de Gama virrey de las Indias; dividió Brasil en capitanías; introdujo la Inquisición en Portugal; admitió en sus estados a los jesuitas y envió misioneros a la India y América.
María Manuela de Portugal (1527-1545). Princesa de Asturias e infanta de Portugal perteneciente a la casa de Avís, nacida en la ciudad de Coimbra el 15 de octubre de 1527 y muerta en Valladolid el 12 de julio de 1545. Hija de Juan III rey de Portugal y de Catalina de Austria, hermana de Carlos V. Fue la primera esposa del futuro Felipe II ...
Nacimiento: 1502 Defunción: 1557 Padres. Manuel I de Portugal [Avis] "El Afortunado", Rey de Portugal [Alcochete (Setubal, Portugal), 31/05/1469 - Lisboa, 13/12/1521] María de Trastámara, Infanta de Castilla y Aragón
Medidas: 107 cm x 84 cm. Escuela: Flamenca. Tema: Retrato. Procedencia: Colección Real. Sala 53. Catalina de Austria, esposa de Juan III de Portugal. Juana de Austria. Isabel de Valois sosteniendo un retrato de Felipe II. La infanta Isabel Clara Eugenia y Magdalena Ruiz.
