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  1. In 1970, Smith and Kent W. Wilcox discovered the first type II restriction enzyme, which is now known as HindII. Smith went on to discover DNA methylases that constitute the other half of the bacterial host restriction and modification systems, as hypothesized by Werner Arber of Switzerland.

    • Tipo L
    • Tipo II
    • Tipo III
    • Tipo IV
    • Tipo V
    • Enzimas de Restricción Artificiales

    Las enzimas de restricción de tipo I fueron las primeras en identificarse y se identificaron por primera vez en dos cepas diferentes (K-12 y B) de E. coli. Estas enzimas cortan en un sitio que difiere y está a una distancia aleatoria (al menos 1000 pb) de su sitio de reconocimiento. La escisión en estos sitios aleatorios sigue un proceso de translo...

    Las enzimas de restricción típicas de tipo II difieren de las enzimas de restricción de tipo I en varios aspectos. Forman homodímeros, con sitios de reconocimiento que suelen ser indivisos y palindrómicos y de 4 a 8 nucleótidos de longitud. Reconocen y escinden el ADN en el mismo sitio y no utilizan ATP ni AdoMet para su actividad; por lo general, ...

    Las enzimas de restricción de tipo III (p. ej., EcoP15) reconocen dos secuencias no palindrómicas separadas que están inversamente orientadas. Cortan el ADN entre 20 y 30 pares de bases después del sitio de reconocimiento. Estas enzimas contienen más de una subunidad y requieren cofactores AdoMet y ATP para sus funciones en la metilación del ADN y ...

    Las enzimas de tipo IV reconocen el ADN modificado, normalmente metilado, y se ejemplifican en los sistemas McrBC y Mrr de E. coli.

    Las enzimas de restricción de tipo V (p. ej., el complejo cas9-gRNA de CRISPR) utilizan ARN guía para dirigirse a secuencias no palindrómicas específicas que se encuentran en los organismos invasores. Pueden cortar ADN de longitud variable, siempre que se proporcione un ARN guía adecuado. La flexibilidad y la facilidad de uso de estas enzimas las h...

    Las enzimas de restricción artificiales se pueden generar mediante la fusión de un dominio de unión al ADN natural o diseñado con un dominio de nucleasa (a menudo, el dominio de escisión de la enzima de restricción tipo IIS FokI). Tales enzimas de restricción artificiales pueden dirigirse a sitios de ADN grandes (hasta 36 pb) y pueden diseñarse par...

  2. 1 de ene. de 2010 · A year later, working with Thomas J. Kelly, Jr. and Kent W. Wilcox, Smith isolated and characterized the first Type II restriction endonuclease (HindII) from Haemophilus influenzae and determined the sequence of its cleavage site (2, 3).

    • Nicole Kresge, Robert D. Simoni, Robert L. Hill
    • J Biol Chem. 2010 Jan 15; 285(3): e2-e3.
    • 2010
    • 2010/01/01
  3. 10 de jul. de 2018 · Posterior al descubrimiento de EcoB y EcoK, los investigadores Hamilton O. Smith y Kent Wilcox aislaron y caracterizaron la primera enzima de restricción de una especie bacteriana diferente: Haemophilus influenzae, HindII.

  4. 12 de ene. de 2012 · As a new Johns Hopkins faculty member, Smith, together with his first graduate student, Kent Wilcox, geared up to study recombination in vitro but instead discovered the restriction enzyme “R” in Haemophilus influenzae.

    • Jane Gitschier
    • 10.1371/journal.pgen.1002466
    • 2012
    • PLoS Genet. 2012 Jan; 8(1): e1002466.
  5. Hamilton O. Smith (Nueva York, 23 de agosto de 1931) es un científico estadounidense. Estudia Matemáticas en las universidades de Illinois y Berkeley, posteriormente estudia Medicina en la Universidad Johns Hopkins, de Baltimore.

  6. Más tarde, en 1970, se caracterizó la primera nucleasa de restricción por Daniel Nathans Hamilton Smith, aislada de Haemophilus influenzae, denominada Hind I. En la actualidad, se sabe que todas las especies de bacterias sintetizan uno o más tipos de endonucleasas capaces de hacer cortes en secuencias específicas de nucleótidos de una ...